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移液器白皮書:熱循環(huán)模塊

Opentrons 熱循環(huán)模塊 GEN2 可為您的實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確均勻的擴(kuò)增溫度同時(shí)維持較低的蒸發(fā)率。

Opentrons 熱循環(huán)模塊 GEN2

產(chǎn)品說明

Opentrons  熱循環(huán)模塊是一個(gè)放置在甲板上的全自動(dòng)化 的熱循環(huán)儀器,提供了一個(gè)96孔板式的全自動(dòng) PCR 功能。 熱循環(huán)模塊與所有的 Opentrons 儀器和軟件都兼容,所以 可以在 Opentrons  儀器上實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化的 PCR 前處理和PCR 流程。

Opentrons 熱循環(huán)模塊的孔板上配有自動(dòng)加熱蓋和可更 換的密封元件,以確保有效的加熱樣品的同時(shí)把樣品蒸發(fā) 量降到最低。在熱循環(huán)完成后,通過孔板上升裝置使孔板塊 上升,然后可以手動(dòng)或者使用機(jī)械轉(zhuǎn)板抓手將 PCR 孔板 移出。排氣口將熱循環(huán)儀中的熱空氣排出,并將其導(dǎo)向遠(yuǎn)離機(jī)器甲板的地方。

Opentrons?熱循環(huán)模塊
熱循環(huán)儀器規(guī)格

性能數(shù)據(jù)

Opentrons對(duì)熱循環(huán)模塊 GEN2  進(jìn)行了一系列嚴(yán)格的性能測試,以保障儀器品質(zhì)遵守行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的性能規(guī)范

 1在穩(wěn)定狀態(tài)下溫度的準(zhǔn)確度和一致性

性能對(duì)比
表1.在穩(wěn)定狀態(tài)下溫度的一致性和準(zhǔn)確度測試結(jié)果。
在5個(gè)目標(biāo)溫度下,對(duì)裝有液體體積為20μL和100μL的8個(gè)不同的熱循環(huán)模塊進(jìn)行一致性和準(zhǔn)確性評(píng)估。在每個(gè)目標(biāo)溫度下,熱循環(huán)模塊的一致性和準(zhǔn)確度的結(jié)果都在預(yù)期的范圍內(nèi)。

溫度升降速率(變溫率)

對(duì)8個(gè)不同的儀器在加熱(到99℃)和冷卻(到4℃)期間測量其平均最大溫度升降速率。每個(gè)定點(diǎn)的保持時(shí)間為5分鐘。熱循環(huán)儀的最大平均變溫率為4 .45℃/s

性能數(shù)據(jù)

通過用可重復(fù)使用的密封元件,多種反應(yīng)體系,96孔 PCR板,對(duì)儀器的擴(kuò)增一致性進(jìn)行了測試。
使用 Lambda 引物擴(kuò)增 Lambda DNA,熱循環(huán)參數(shù)如下: 在94℃孵育10分鐘,25個(gè)循環(huán),每個(gè)循環(huán)分別在94℃ 下擴(kuò)增15秒和在70 ℃擴(kuò)增1分鐘,并在72 ℃下延伸7 分鐘。通過使用讀扳機(jī)捕獲原始熒光值對(duì)每個(gè)孔槽的擴(kuò)增量進(jìn)行了測量。
通過計(jì)算得出變異系數(shù) (CV%) 見表2。數(shù)據(jù)表明,密封圈可以重復(fù)使用多達(dá)25次,且不會(huì)降低性能。在10 μL 和 100μL 反應(yīng)體積下,CV值均保持較低。此外,使用 OT-2的 96孔PCR 板,在10uL 到100uL 這個(gè)較大的范圍區(qū)間內(nèi),熱循環(huán)模塊都具有較好的擴(kuò)增重復(fù)性。

表2.放大一致性的結(jié)果

低蒸發(fā)率

對(duì) 5 0 個(gè)不同的熱循環(huán)模塊的蒸發(fā)率進(jìn)行了評(píng)估,在 PCR 96孔板中樣品的體積分別為10μL,20μL,50μL  和100 μL。在 PCR 運(yùn)行3步前后分別測量了樣品的體積重量;包 括35次循環(huán),每次循環(huán)的設(shè)定溫度和保持時(shí)間為:94℃(10 s)、70 ℃(30s)和72℃(30s)。

所有測試樣品體積的平均蒸發(fā)率均<6%,最大樣品體積(100μL)平均蒸發(fā)率均<1%。

數(shù)據(jù)表明,Opentrons    熱循環(huán)模塊 GEN2 有著一致可靠的擴(kuò)增功能,最小樣品體積損失低至僅10 μL。該模型展示了溫度快速 升降速率和在各種不同的設(shè)定點(diǎn)對(duì)溫度的穩(wěn)定保持能力。在重復(fù)使用一次性密封圈,使用多種反應(yīng)體積,和無論是否在機(jī)制備樣品的情況下,96 孔板的擴(kuò)增均被證明是一致均勻的。Opentrons  熱循環(huán)儀 GEN2  的 9 6 孔 位 PCR 通過各種測試證明其提供了可重復(fù)和準(zhǔn)確的擴(kuò)增結(jié)果,以保證實(shí)驗(yàn)室日常實(shí)驗(yàn)的一致性。

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