在分子生物實驗中，PCR（聚合酶鏈式反應）作為基礎技術之一，廣泛應用于病原檢測、基因表達分析、文庫建庫等領域。然而，傳統(tǒng)的手動PCR體系搭建不僅耗時耗力，而且容易出現(xiàn)人為誤差。Opentrons Flex PCR 工作站正是為解決這些問題而誕生的自動化平臺，適合中高通量實驗室進行PCR相關流程的標準化和自動處理。
本篇教程將為您提供一份從開機準備到實驗運行的全流程操作指南，讓您快速上手 Opentrons Flex PCR 平臺，充分釋放其在自動移液與建庫流程中的高效能。

移液工作站

一、實驗前準備工作
在正式啟動 Opentrons Flex PCR 操作前，請確保實驗室環(huán)境處于潔凈、無塵、溫濕度穩(wěn)定的狀態(tài)。提前準備好以下材料：
PCR所需試劑（如模板DNA、引物、酶、反應緩沖液等）
符合規(guī)格的96孔或384孔PCR板
低吸附吸頭（與Flex移液模塊兼容）
冷卻模塊（建議啟用，用于保護酶活性）
預加載好程序的控制電腦
所有耗材建議使用無DNA酶/RNA酶污染的認證產(chǎn)品，以防實驗失敗。

二、開機與平臺初始化
啟動 Opentrons Flex PCR 工作站 后，系統(tǒng)會自動完成基本初始化，包括機械臂自檢、模塊對位、系統(tǒng)更新檢測等。打開控制軟件后，進入儀器主界面，用戶可選擇創(chuàng)建新的實驗流程或載入已有模板。
如果是首次使用建議：
先校準吸頭裝配位置與孔板位置；
運行一次空板檢測流程，確保機械臂無偏移；
激活冷卻模塊與吸頭更換系統(tǒng)。
所有參數(shù)設定都可通過軟件的圖形化界面完成，操作直觀。

三、構建PCR自動化流程
Opentrons Flex PCR 的操作邏輯由多個“步驟模塊”構成，例如“吸液”、“分液”、“混合”、“更換吸頭”、“等待時間”等，用戶可按實驗需求自定義組合。
以PCR體系配置為例：
加載反應板和吸頭：將吸頭盒和PCR板放置在平臺指定位置，對應軟件內的槽位設定。
吸取 Master Mix：設定源孔、吸液體積、吸速、預混參數(shù)。
分配 Master Mix 至每孔：設定目標孔、加液體積與加樣順序。
吸取模板DNA：設定模板源與體積，避免樣本交叉污染。
分配模板至對應孔：分組加樣、混合后完成反應體系構建。
完成后提示封板與離開平臺：避免污染并進入PCR擴增階段。
整個流程可保存為模板，下次直接載入復用，極大節(jié)省操作時間。

四、運行與監(jiān)控實驗流程
流程設置完畢后，點擊“Run”開始執(zhí)行自動化流程。運行過程中，系統(tǒng)會實時顯示進度條、當前步驟、剩余時間等信息。如果系統(tǒng)檢測到吸頭安裝異常、移液壓力波動或板位偏移，將自動暫停并提示用戶干預。
在Flex平臺上運行PCR體系配置，不僅顯著提高了操作效率，也有效消除了人為誤差，使每一次加樣更穩(wěn)定、更可控。
建議用戶開啟日志功能，將每次操作自動生成報告文檔，便于質量追蹤與實驗溯源。

五、完成實驗后的處理
當平臺完成加樣任務后：
手動封板：使用光學透明膜或PCR封板膜進行密封。
轉移至熱循環(huán)儀：根據(jù)反應體系所需設定循環(huán)參數(shù)。
清理平臺：取下PCR板與吸頭盒，使用無塵布或酒精擦拭平臺殘留液體。
關機或進入待機模式：若不繼續(xù)操作，可將系統(tǒng)關閉或轉入節(jié)能待機狀態(tài)。
建議每次實驗后檢查吸頭廢棄槽與模塊狀態(tài)，定期運行校準流程，確保平臺始終保持高精度運行。

六、常見問題與注意事項
在使用 Opentrons Flex PCR 工作站 過程中，如遇以下問題可參考處理建議：
吸液不準：檢查吸頭裝配是否到位，液體是否存在氣泡。
混合不均：嘗試增加混合次數(shù)或設定吸吐速率。
吸頭丟失或偏移：重新校準吸頭安裝位置或更換耗材。
模板交叉污染：確保每次樣本吸液前進行吸頭更換。
同時，建議定期更新軟件版本，獲取最新的Bug修復和功能增強。

通過本文教程，您已經(jīng)全面了解了 Opentrons Flex PCR 工作站在PCR反應體系搭建中的標準操作流程。從設備初始化、流程設計到樣本分配與平臺維護，每一個環(huán)節(jié)都圍繞“高效、精準、可重復”三大核心價值展開。
在PCR通量日益增長、手工操作瓶頸日益顯著的今天，F(xiàn)lex平臺的引入，不僅為實驗室?guī)砹诵噬系耐黄?，更為科研結果的穩(wěn)定性提供了堅實保障。
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